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若某质粒带有lacZ标记基因,那么与之相匹配的筛选方法是在筛选培养基中加入()
A.半乳糖
B.葡萄糖
C.蔗糖
D.5-溴-4-氯-3-吲哚基-b-D-半乳糖苷(X-gal)
E.异丙基巯基-b-半乳糖苷(IPTG)
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A.半乳糖
B.葡萄糖
C.蔗糖
D.5-溴-4-氯-3-吲哚基-b-D-半乳糖苷(X-gal)
E.异丙基巯基-b-半乳糖苷(IPTG)
(1)画出该质粒的酶切图谱,标明抗性基因的位置和酶切位点。 (2)如用HindⅢ切割未标记的上述DNA片段,得到5.5 kb和2.5 kb两段。如果在EcoRⅠ的3.5 kb酶切片段上没有HindⅢ切点,则用双酶(EcoRⅠ+HindⅢ)切割后会得到什么样的片段?
A.提高受体细胞在自然环境中的耐药性
B.有利于对目的基因是否导入进行检测
C.增加质粒分子的分子量
D.便于与外源基因连接
质粒pHUBI DNA是双链环状,长5.7kb(5.7×103个碱基对)。这个质粒带有某基因,它的蛋白质产物使宿主细菌对四环素具有抗性(Tet-r)。该DNA对下列每种限制酶具有一个识别位点:EcoRI、HpaI、BamHI、PstI、SalI、BglII。在BarnHI和SalI位点处克隆会破环四环素抗性;在其他酶的位点处克隆则保留四环素抗性。用各种限制酶以及酶混合物消化可得到如表16-2-11所列的DNA片段。试在pHUBIDNA图上标出所有这些酶的切点。将DNA图画成环形,在圆周上以5.7kb总长标出刻度。
表16-2-11 | |
酶混合物 | 片段长度(kb) |
EcoRI EcoRI,BamHI EcoRI,HpaI EcoRI,SalI EcoRI,BglII EcoRI,PstI PstI,BglII BglII,HpaI | 5.7 0.4,5.3 0.5,5.2 0.7,5.0 1.1,4.6 2.4,3.3 1.3,4.4 0.6,5.1 |
下列哪项叙述不正确
A.F质粒的主要特征是带有耐药性基因
B.R质粒又称抗药性质粒
C.Col质粒可产生大肠杆菌素
D.F质粒是一种游离基因
E.R质粒在基因克隆中应用最多
A.质粒的复制独立于宿主细胞
B.质粒带有选择性标记
C.大多数细菌来源的质粒核酸是环状双链DNA分子
D.质粒DNA分子通常具有五种不同的构型
E.质粒DNA分子具有一般核酸分子的理化特性
二氢叶酸还原酶缺陷型(dfr-)仓鼠细胞株用质粒转化,该质粒含dfr-结构基因,并与激素诱导基因的启动基因以及另一个在本系统是显性选择标记的基因xgp相连。转化细胞根据合成Xgp的能力进行选择。所有这些挑选的细胞也都能合成Dfr。用剂量递增的氨甲蝶呤处理细胞。选择出一株细胞,比出发的转化细胞对氨甲蝶呤的抗性高200倍,同时Dfr酶含量也高200倍。