A.是一种能与DNA的κB序列结合的核蛋白因子
B.与IκB结合以无活性状态被锚定于胞质
C.IκB磷酸化,NF-κB得以活化
D.活化的NF-κB入核调节基因转录
E.NF-κB磷酸化后失去活性
真核RNA聚合酶Ⅱ最大亚基C末端重复序列的功能是()。
A.磷酸化使RNA聚合酶Ⅱ与其他转录因子解离,促进转录的起始与延伸
B.乙酰化使RNA聚合酶Ⅱ与组蛋白竞争结合与。DNA上,促进转录的起始与延伸
C.甲基化使RNA聚合酶Ⅱ活化,促进转录的起始与延伸
D.三者都有
在真核细胞中DNA折叠成为染色质是如何影响转录的?你可以应用C-负转录单元解决这个问题。这个模板在RNApolⅡ及四个转录因子(TFⅡA、TFⅡB、TFⅡD和TFⅡE)存在下能很好地转录。
为了检验染色质对转录的影响,首先将模板装配成核小体(核小体来自蛙卯母细胞抽提物)并纯化染色质模板,然后加入转录组分,结果没有发生转录(图13-3-48)。然后改变步骤,首先,在缺少NTPs的情况下将模板和转录组分一起温育,然后将模板装配为核小体,再纯化染色质模板。现在,当要再加入转录组分时,转录顺利进行就如在裸露的DNA模板上进行的转录一样,这样得出结论:一个或多个转录组分一定同模板结合,然后使启动子可以接近。
为了更进一步了解这种现象,再做两个附加实验。在第~个实验中,在温育过程中少加一种转录组分;在第二个实验中,在进行转录分析中少加一种转录组分。
A.全酶和核心酶在DNA上的结合位点是相同的
B.σ因子可以提高全酶对启动子的亲和力
C.σ因子促进RNA聚合酶与DNA的紧密结合
D.新生RNA的5'端通常为pppA或者pppG
A.是特异性高的转录调控因子
B.是真核生物细胞核内的组蛋白
C.原核生物的启动序列在真核生物中就称为增强子
D.是一些较短的能增强转录的DNA重复序列
E.在结构基因的5’端的DNA序列
因子通常已经失活。你可以想出一个极好的方法以加快分析速度。你可以合成一段不含胞嘧啶核苷酸的DNA序列,将这段序列放到启动子后在一适当反应混合物中温育,这个启动子将指导不含鸟嘌呤核苷酸的转录本的合成,如果不加GTP,只产生一定长度的RNA转录本,这个RNA转录本来自于合成的DNA序列。因为其他转录本都在需G处被终止。如果你能使这个想法得到实现,则快速分析特殊序列的转录仅通过测量标记核苷酸的放射性就可实现。
为了验证你的想法,你构建两个携带合成DNA的质粒。一个具有腺病毒的启动子(PmL1),另一个无启动子(PC1)。把两种质粒同纯化的RNApolⅡ、纯化好的转录因子样品及32P-CTP混合,除此之外,再加入各种组合的GTP、RNaseT1(可以切开RNA与G的连接)和3'-氧甲基GTP(无论何时它参入正在形成的链,它就会终止转录),通过凝胶电泳测定结果如图13-3-42所示。