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[主观题]

在细菌质粒pBP1的四环素抗性基因tetR的中间有一个Hind Ⅲ的切点。用Hind Ⅲ切割果蝇基因组DNA,以pBP1为载体构

在细菌质粒pBP1的四环素抗性基因tetR的中间有一个Hind Ⅲ的切点。用Hind Ⅲ切割果蝇基因组DNA,以pBP1为载体构建基因组文库。分子杂交证明克隆15带有果蝇的目的基因。用Hind Ⅲ和EcoR Ⅴ对克隆15进行了酶切分析,电泳结果如图Q18.1(用酶切的pBP1质粒DNA作对照),旁边标出了片段的大小。

在细菌质粒pBP1的四环素抗性基因tetR的中间有一个Hind Ⅲ的切点。用Hind Ⅲ切割果蝇基因

图Q18.1酶切电泳图谱

1~2:Hind Ⅲ切割;3~4:EcoR Ⅴ切割;5~6:Hind Ⅲ+EcoR Ⅴ;1、3、5是质粒DNA;2、4、6是15号克隆

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第1题
质粒pHUBI DNA是双链环状,长5.7kb(5.7×103个碱基对)。这个质粒带有某基因,它的蛋白质产物使宿主细菌对四环素

质粒pHUBI DNA是双链环状,长5.7kb(5.7×103个碱基对)。这个质粒带有某基因,它的蛋白质产物使宿主细菌对四环素具有抗性(Tet-r)。该DNA对下列每种限制酶具有一个识别位点:EcoRI、HpaI、BamHI、PstI、SalI、BglII。在BarnHI和SalI位点处克隆会破环四环素抗性;在其他酶的位点处克隆则保留四环素抗性。用各种限制酶以及酶混合物消化可得到如表16-2-11所列的DNA片段。试在pHUBIDNA图上标出所有这些酶的切点。将DNA图画成环形,在圆周上以5.7kb总长标出刻度。

表16-2-11

酶混合物片段长度(kb)
EcoRI

EcoRI,BamHI

EcoRI,HpaI

EcoRI,SalI

EcoRI,BglII

EcoRI,PstI

PstI,BglII

BglII,HpaI

5.7

0.4,5.3

0.5,5.2

0.7,5.0

1.1,4.6

2.4,3.3

1.3,4.4

0.6,5.1

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第2题
质粒PSC101带有何种抗性基因()

A.卡那霉素抗性基因

B.四环素抗性基因

C.青霉素抗性基因

D.链霉素抗性基因

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第3题
pBR322质粒载体,目的基因插入氨苄青霉素基因内部,重组体菌株的遗传表现为()。

A.四环素抗性,氨苄青霉素失活

B.四环素失活,氨苄青霉素抗性

C.四环素抗性,氨苄青霉素抗性

D.四环素失活,氨苄青霉素失活

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第4题
有一个带有氨苄青霉素和四环素抗性的质粒,在其四环素抗性基因内有一个该质粒唯一的EcoRⅠ酶切点。今欲用EcoRⅠ
位点克隆果蝇DNA,构建一个基因库,连接的产物转化大肠杆菌菌株DH5,试问:(1)在培养基中加入哪一种抗生素用于选择阳性克隆?(2)对哪一种抗生素有抗性的质粒携带外源果蝇DNA片段?(3)如果有的克隆可抗两种抗生素,如何解释?
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第5题
细菌的质粒分子带有一个抗菌素抗性基因,该抗性基因在基因工程中的主要作用是()

A.提高受体细胞在自然环境中的耐药性

B.有利于对目的基因是否导入进行检测

C.增加质粒分子的分子量

D.便于与外源基因连接

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第6题
人们常选用的细菌质粒分子往往带有一个抗菌素抗性基因,该抗性基因的主要作是()

A.提高受体细胞在自然环境中的耐药性

B.有利于对目的基因是否导入进行检测

C.增加质粒分子的分子量

D.便于与外源基因连接

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第7题
某种长3 kb的质粒带有一个氨苄青霉素抗性基因和一个四环素抗性基因,该质粒含有下列酶的单一位点:
EcoRⅠ、BglⅡ、HindⅢ、PstⅠ、SalⅠ。如果DNA克隆到EcoRⅠ位点,两种基因抗性都不受影响;DNA克隆到.BglⅡ、HindⅢ或SalⅠ位点,会破坏四环素抗性;DNA克隆到PstⅠ位点,会破坏氨苄青霉素抗性。用限制酶完全切割该质粒,得到以下结果:

(1)画出该质粒的酶切图谱,标明抗性基因的位置和酶切位点。 (2)如用HindⅢ切割未标记的上述DNA片段,得到5.5 kb和2.5 kb两段。如果在EcoRⅠ的3.5 kb酶切片段上没有HindⅢ切点,则用双酶(EcoRⅠ+HindⅢ)切割后会得到什么样的片段?

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第8题
的质粒分子带有一个抗菌素抗性基因,该抗性基因在基因工程中的主要作用是()

A.提高受体细胞在自然环境中的耐药性

B.有利于对目的基因是否导入进行检测

C.增加质粒分子的分子量

D.便于与外源基因连接

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第9题
ColEl是惟一用作基因工程载体的自然质粒,这种质粒()

A.是松弛复制型

B.具有,四环素抗性

C.能被氯霉素扩增

D.能产生肠杆菌素

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第10题
含有抗性基因的重组质粒转入宿主菌,重组菌获得了抗药性,发酵时在培养基中加入适量的相应()可以抑制质粒丢失菌的生长,消除了重组质粒分裂不稳定的影响。

A.抗生素

B.干扰素

C.抗毒素

D.激素

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