利用简单重复序列(SSR)作探针从文库中分离出几个克隆。现在要鉴定与这些重复序列毗邻的单一序列,
利用简单重复序列(SSR)作探针从文库中分离出几个克隆。现在要鉴定与这些重复序列毗邻的单一序列,以期在基因组中建立基于SSR的STS。 (1)如何鉴定分离出的克隆中是否有单一序列? (2)最有用的STS是那些与人群中存在多态性的SSR相连的STS。如何鉴定一个STS是否与多态性的SSR相连?
利用简单重复序列(SSR)作探针从文库中分离出几个克隆。现在要鉴定与这些重复序列毗邻的单一序列,以期在基因组中建立基于SSR的STS。 (1)如何鉴定分离出的克隆中是否有单一序列? (2)最有用的STS是那些与人群中存在多态性的SSR相连的STS。如何鉴定一个STS是否与多态性的SSR相连?
人类基因组DNA经过Sau3A(G↓ATC)部分酶切后,连接到载体pCU999的BamHⅠ位点上 (G↓GATCC)。BamHⅠ位于多克隆位点的SalⅠ和NotⅠ之间,二者距离20 bp。 (1)从文库中分离出某克隆(克隆1),分别用NotⅠ(N)、SalⅠ(S)或SalⅠ十NotⅠ(S十N)酶切后,电泳分离并用EB染色。DNA转移到膜上后,用载体上的DNA作为探针进行杂交,结果如下图所示:
假设同源序列50 bp以下则无杂交信号。在此基因组DNA上标上所有的SalⅠ和NotⅠ位点,标明酶切位点间距离。 (2)从同样的文库中分离到带有重叠片段的克隆(克隆2),用同样的酶切、电泳、转膜后,以克隆1的DNA为探针(包括基因组DNA和载体DNA)进行southern杂交,结果如下图所示:
画出克隆2的图,标明所有SalⅠ和NotⅠ位点及位点间距离。 (3)所有的人类基因组DNA都用SalⅠ酶切,并用来自于克隆1或克隆2的DNA为探针作Southern杂交,结果如下图所示:
其中6个SalⅠ切点的位置可以用以上的结果来确定。请画出这一区域的SalⅠ位点图。
A.从基因组文库中获取的某种生物的部分基因,可以实现物种间的基因交流
B.从cDNA文库中获取的目的基因,既无启动子,又无终止子
C.用人胰高血糖素基因制成的DNA探针,检测人胰岛B细胞中的mRNA,可形成杂交分子
D.基因表达载体中的标记基因不能含有限制酶的切割位点
A.利用 DNA 聚 合 酶 将 基 因 B 与 质 粒 连 接 后, 导入玫瑰细胞
B.利用限制性核酸内切 酶 从 蓝 色 花 的 矮 牵 牛 基 因文库中获取基因 B
C.提取矮牵牛蓝 色 花 的 mRNA,经 逆 转 录 获 得 互补的 DNA,再扩增基因 B
D.将 基 因 B 直 接 导 入 大 肠 杆 菌,然 后 感 染 并 转 入玫瑰细胞
A.从基因文库中获取的某种生物的部分基因,可以实现物种间的基因交流
B.从cDNA文库中获取的目的基因,既无启动子,又无终止子
C.用人胰高血糖素基因制成的DNA探针,检测人胰岛B细胞中的mRNA,可形成杂交分子
D.基因表达载体中的标记基因,不能含有构建表达载体所用的限制酶的切割位点
A.一般具有物种特异性
B.在适当的情况下,可以应用它们作为探针区分不同种哺乳动物细胞的DNA
C.中度重复序列一般不编码蛋白质
D.有些中度重复序列是编码蛋白质或rRNA的结构基因
E.功能可能类似于高度重复序列
A.①②③⑤
B.①②⑤⑥
C.①②③④
D.①②④⑥