某种长3 kb的质粒带有一个氨苄青霉素抗性基因和一个四环素抗性基因,该质粒含有下列酶的单一位点:
(1)画出该质粒的酶切图谱,标明抗性基因的位置和酶切位点。 (2)如用HindⅢ切割未标记的上述DNA片段,得到5.5 kb和2.5 kb两段。如果在EcoRⅠ的3.5 kb酶切片段上没有HindⅢ切点,则用双酶(EcoRⅠ+HindⅢ)切割后会得到什么样的片段?
(1)画出该质粒的酶切图谱,标明抗性基因的位置和酶切位点。 (2)如用HindⅢ切割未标记的上述DNA片段,得到5.5 kb和2.5 kb两段。如果在EcoRⅠ的3.5 kb酶切片段上没有HindⅢ切点,则用双酶(EcoRⅠ+HindⅢ)切割后会得到什么样的片段?
质粒pHUBI DNA是双链环状,长5.7kb(5.7×103个碱基对)。这个质粒带有某基因,它的蛋白质产物使宿主细菌对四环素具有抗性(Tet-r)。该DNA对下列每种限制酶具有一个识别位点:EcoRI、HpaI、BamHI、PstI、SalI、BglII。在BarnHI和SalI位点处克隆会破环四环素抗性;在其他酶的位点处克隆则保留四环素抗性。用各种限制酶以及酶混合物消化可得到如表16-2-11所列的DNA片段。试在pHUBIDNA图上标出所有这些酶的切点。将DNA图画成环形,在圆周上以5.7kb总长标出刻度。
表16-2-11 | |
酶混合物 | 片段长度(kb) |
EcoRI EcoRI,BamHI EcoRI,HpaI EcoRI,SalI EcoRI,BglII EcoRI,PstI PstI,BglII BglII,HpaI | 5.7 0.4,5.3 0.5,5.2 0.7,5.0 1.1,4.6 2.4,3.3 1.3,4.4 0.6,5.1 |
A.苏云金芽孢杆菌抗虫基因
B.土壤农杆菌中的RNA分子
C.大肠杆菌的质粒
D.动物细胞的染色体
在细菌质粒pBP1的四环素抗性基因tetR的中间有一个Hind Ⅲ的切点。用Hind Ⅲ切割果蝇基因组DNA,以pBP1为载体构建基因组文库。分子杂交证明克隆15带有果蝇的目的基因。用Hind Ⅲ和EcoR Ⅴ对克隆15进行了酶切分析,电泳结果如图Q18.1(用酶切的pBP1质粒DNA作对照),旁边标出了片段的大小。
图Q18.1酶切电泳图谱
1~2:Hind Ⅲ切割;3~4:EcoR Ⅴ切割;5~6:Hind Ⅲ+EcoR Ⅴ;1、3、5是质粒DNA;2、4、6是15号克隆
A.四环素抗性,氨苄青霉素失活
B.四环素失活,氨苄青霉素抗性
C.四环素抗性,氨苄青霉素抗性
D.四环素失活,氨苄青霉素失活
A.5 12 KB
B.256 MB
C.256 MB+5 12 KB
D.256 MB一512 KB
A.提高受体细胞在自然环境中的耐药性
B.有利于对目的基因是否导入进行检测
C.增加质粒分子的分子量
D.便于与外源基因连接
A.提高受体细胞在自然环境中的耐药性
B.有利于对目的基因是否导入进行检测
C.增加质粒分子的分子量
D.便于与外源基因连接
A.提高受体细胞在自然环境中的耐药性
B.有利于对目的基因是否导入进行检测
C.增加质粒分子的分子量
D.便于与外源基因连接