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用EMS处理野生型单倍体脉孢菌细胞使之产生突变。在25℃时大多数细胞可以在含完全培养基的平板上长
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野生型单倍体粗糙脉孢菌(Neurospora)能够自己合成色氨酸,突变等位基因td导致其丧失了这一功能。基因型为td的突变体需要在培养基中添加色氨酸才能生长。这种表型受到等位基因su的抑制,因此同时带有su和td两个突变基因的菌株不再依赖色氨酸。等位基因su与td独立分配。 (1)将tdsu菌株与基因型为野生型的菌株杂交,后代的基因型及其比例如何? (2)上述杂交后代中色氨酸依赖型与非依赖型的比例如何?
在粗糙脉孢菌中,一个带有交配型基因A和突变基因arg-l的菌株,与一个带有交配型等位基因a和野生型基因arg-l(十)的菌株进行杂交,得到400个顺序四分子,可归为以下7类 (每一类均含有几种不同的孢子顺序。):
(1)图示推断交配型基因座与arg-l基因座之间的连锁关系。在图中标出着丝粒的位置,在所有的间距中都要注明图距。 (2)图示产生第6类四分子的减数分裂模式。
(1)不添加亮氨酸则不能在基本培养基上生长。 (2)将这些细胞转移到能够诱导其有性生殖的培养基上,它们不能杂交。 (3)即使添加亮氨酸也不能在37℃下生长。 (4)能与交配型a的细胞杂交,而不能与交配型A杂交。 (5)与交配型a杂交产生的后代中有与核型1相同的基因型出现,但没有发现与核型2相同的基因型。 说明这些奇怪的细胞是如何从原来的异核体产生的,并解释观察到的现象。
下列染色体重组发生在不同的脉孢菌(具有7条染色体)突变株中: (1)染色体1(最大的染色体)的臂内插入。 (2)染色体1的臂间插入。 (3)一半的染色体1和一半的染色体7(最小的染色体)交换,发生相互易位。 (4)一条染色体的一部分插入另一条染色体。 (5)二体(n+1)。 (6)单体(2规一1)。 (7)染色体某一大片段的串联重复。 从这些突变株和野生型中,仔细分离出DNA,避免机械损伤,样品进行脉冲电泳,预测上述每一种情况下你可能观察到的结果。
脉孢菌me-2基因座位上有两个等位基因α和β,用α和β进行杂交,杂交中用trp和pan作为标记,二者都是在me-2的一端加上一段长5 mu的序列。杂交所得的子囊孢子植于含有色氨酸和泛酸但不含蛋氨酸的培养基上。培养基上生长的蛋氨酸原养型菌被分离出来,测定遗传标记,结果如下:
解释这一结果。
用T4病毒的两个品系感染大肠杆菌细胞,一个品系是小噬菌斑(m)、快速溶菌(r)和噬菌斑浑浊(tu)突变型;另一个品系对这3个标记都是野生型(十 十 十)。将上述感染的溶菌产物涂平板,结果如下:
(1)测定m—r、r—tu和m一tu的连锁距离? (2)这3个基因的连锁顺序如何? (3)并发系数是多少?它意味着什么?
图Q4.2多种rⅡ突变体的斑块测试
这些结果很有意义,但你也许会感觉迷惑。为了确定在清晰斑上出现的是哪种噬菌体,你从野生斑和突变5形成的清晰斑中收集一些噬菌体并检测它们的生长情况。如你所料,从野生斑上收集的噬菌体在大肠杆菌B和K上都可形成正常的噬菌斑。在突变5斑块上收集来的大多数噬菌体仍显示出突变体的性质:它们可以在大肠杆菌B上形成r噬菌斑,但不能在大肠杆菌K上生长;但来自突变5斑块上的某些噬菌体却表现为野生型,它们可在两个细胞株中形成正常的噬菌斑,野生型出现的频率很高,不可能来自反向突变(回复突变),因为反向突变即使发生,频率也只有10-6~10-5。