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[主观题]

用不同的限制酶Pst I和Saι I切割同一染色体DNA并克隆。利用X基因两端引物进行菌落扩增,在Pst工切

割的克隆中未能筛到X基因,但Saι I切割的克隆中筛到了X基因,为什么?

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第1题
限制酶EcoR I的识别序列为GAATTC,切割位点在对称轴的5末端,Pst I的识别序列为CTGCAG,切割位点在
对称轴的3末端。试写出切割后DNA分子的5和3末端,如将切割后的DNA分子与4种dNTPs和DNA聚合酶I一起温育,则产生什么样的末端?如需连接经上步骤处理的末端,如何能够完成?

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第2题
某种长3 kb的质粒带有一个氨苄青霉素抗性基因和一个四环素抗性基因,该质粒含有下列酶的单一位点:
EcoRⅠ、BglⅡ、HindⅢ、PstⅠ、SalⅠ。如果DNA克隆到EcoRⅠ位点,两种基因抗性都不受影响;DNA克隆到.BglⅡ、HindⅢ或SalⅠ位点,会破坏四环素抗性;DNA克隆到PstⅠ位点,会破坏氨苄青霉素抗性。用限制酶完全切割该质粒,得到以下结果:

某种长3 kb的质粒带有一个氨苄青霉素抗性基因和一个四环素抗性基因,该质粒含有下列酶的单一位点:Ec(1)画出该质粒的酶切图谱,标明抗性基因的位置和酶切位点。 (2)如用HindⅢ切割未标记的上述DNA片段,得到5.5 kb和2.5 kb两段。如果在EcoRⅠ的3.5 kb酶切片段上没有HindⅢ切点,则用双酶(EcoRⅠ+HindⅢ)切割后会得到什么样的片段?

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第3题
限制酶切割不同来源DNA时,能产生具有相同序列的突出末端的不同片段可能方式是()

A.用相同的限制酶切割

B.用识别相同靶序列的不同限制酶切割

C.用识别不同序列但可产生一致的粘性末端的限制酶切割

D.A和B

E.A、B和C

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第4题
BamH I的识别位点是5-GGATCC-3,切割位点在第一个G的右侧,Sau3A工的识别序列是5-GATC-3,在G的左侧
切割,(1)写出两限制酶切割DNA后所产生的DNA分子末端。(2)如用T4 DNA连接酶将两片段相连,能否连接在一起?(3)该连接的杂合位点可被以上两种酶切割吗?

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第5题
不同DNA分子用同种限制酶切割形成的黏性末端都相同()
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第6题
下列关于基因工程工具的说法错误的是()

A.一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列

B.两种来源不同的DNA用同种限制酶切割后,末端可以相互黏合

C.NA连接酶能使黏性末端的碱基之间形成氢键

D.质粒是拟核或细胞核外能够自主复制的很小的环状DNA分子

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第7题
下列工具酶中,可切割DNA、RNA单链的酶是()。A.碱性磷酸酶B.末端转移酶C.EcoR ID.S1核酸酶

下列工具酶中,可切割DNA、RNA单链的酶是()。

A.碱性磷酸酶

B.末端转移酶

C.EcoR I

D.S1核酸酶

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第8题
限制酶的星号活性是指在非正常条件下,限制酶()

A.识别和切割序列发生变化。

B.切割活性大大提高。

C.识别和切割序列与原来完全不同。

D.可以任意切割DNA。

E.只能部分切割DNA。

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第9题
下面是3种限制性核酸内切酶对DNA分子的识别序列和剪切位点图(箭头表示切点,切出的断面为黏性末端),下列叙述正确的是()限制酶1:--CCGC↓GG--;限制酶2:--↓GATC--;限制酶3:--G↓GATCC--

A.限制性酶1和酶3剪出的黏性末端相同

B.不同的限制酶有不同的识别序列和切割位点,体现了酶的专一性

C.能够识别和切割RNA分子内一小段核苷酸序列的酶只有限制酶2

D.限制酶2和3识别的序列都包含6个碱基对

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第10题
简述把一段DNA克隆进入pUC18质粒的Pst I位点的过程,如何筛选含目的片段的克隆?

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