(1)进行转基因操作前,需用__________酶处理幼蚕组织,以便获得单个细胞。
(2分)
(2)为使干扰素基因在家蚕细胞中高效表达,需要把来自eDNA文库的干扰素基因片段正确插入表达载体的启动子和终止子之间;若要检测干扰素基因在家蚕中是否表达,可分别采用__________、__________的方法逐步鉴定。(6分)
(3)通过PCR技术可大量获取目的基因,该PCR反应体系的主要成分包含:扩增缓冲液
(含Mg2+)、水、4种脱氧核糖苷酸、模板DNA、__________和__________。(4分)
(4)利用生物反应器培养家蚕细胞时,贴壁生长的细胞会产生接触抑制。通常将多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反应器中,这样可以__________,增加培养的细胞数量,也有利于空气交换。(3分)
如图4表示运用基因工程技术生产胰岛素的三条途径。据图结合所学知识回答下列问题:
(1)为了便于将含有目的基因的细胞筛选出来,所选择的质粒上应该具有__________。(3分)
(2)培育转基因羊的过程中,科研人员通过感染或技术将重组质粒M转移到受体细胞A中,受体细胞A应该是__________细胞。③过程中还用到了__________技术。(6分)
(3)受体细胞B应该是莴苣的__________(填“体细胞”“卵细胞”或“受精卵)。导人该细胞后,需对该细胞进行培养,经__________过程形成愈伤组织。(4分)
(4)莴苣为双子叶植物,过程②常用的方法是__________;过程⑥常用的方法是用__________来处理大肠杆菌。使其易于吸纳重组质粒M。(2分)
A.保留正常基因序列,调整致病基因中突变的异常碱基,使致病基因恢复正常功能
B.通过同源重组技术,用正常基因原位替换致病基因,使DNA完全恢复正常状态
C.把正常基因导人体细胞,通过基因非定点整合使其表达,以补偿缺陷基因的功能
D.将特定的反义核酸和核酶导人细胞,在转录和翻译水平阻断某些基因的异常表达