用透析膜插片凝胶电泳法回收DNA片段时,再区带前挖一小槽,将透析膜置于槽中,这时应注意()
A.透析膜要接触DNA区带一侧的胶缘。
B.透析膜不能接触DNA区带一侧的胶缘。
C.透析膜要接触DNA区带相对一侧的胶缘。
D.透析膜不能接触DNA区带相对一侧的胶缘。
E.随意插入槽中即可。
A.透析膜要接触DNA区带一侧的胶缘。
B.透析膜不能接触DNA区带一侧的胶缘。
C.透析膜要接触DNA区带相对一侧的胶缘。
D.透析膜不能接触DNA区带相对一侧的胶缘。
E.随意插入槽中即可。
A.4个
B.3个
C.2个
D.至少2个
Southern印迹法的步骤不包括以下哪项
A.DNA与载体的连接
B.用限制酶消化DNA
C.用凝胶电泳分离DNA片段
D.DNA片段转移至硝酸纤维素膜上
E.用一个标记的探针与膜杂交
A.同聚尾法连接效率高,且易回收插入的片段
B.不匹配的黏性末端可通过部分填补后连接
C.限制酶切割DNA后加入EDTA-SDS终止液抑制限制酶活性,将有利于重组连接
D.平末端连接时,在反应体系中加入适量凝聚剂可提高连接效率
E.Mg2+/ATP是T4DNA连接酶反应时的必要因素
对两个单倍体的面包酵母菌株进行比较,菌株1(交配型α)来自北美,菌株2(交配型a)来自欧洲。用单一的限制性内切酶将DNA线性化后,在凝胶电泳上将DNA分开。菌株1的样品出现两条带,一条很大,另一条很小;菌株2的样品产生两条中等大小的条带。如果运用标准的二倍体出芽方法分析,在二倍体细胞以及细胞所产生的四分子中会得到什么结果(酶切片段是什么样的)?
因子通常已经失活。你可以想出一个极好的方法以加快分析速度。你可以合成一段不含胞嘧啶核苷酸的DNA序列,将这段序列放到启动子后在一适当反应混合物中温育,这个启动子将指导不含鸟嘌呤核苷酸的转录本的合成,如果不加GTP,只产生一定长度的RNA转录本,这个RNA转录本来自于合成的DNA序列。因为其他转录本都在需G处被终止。如果你能使这个想法得到实现,则快速分析特殊序列的转录仅通过测量标记核苷酸的放射性就可实现。
为了验证你的想法,你构建两个携带合成DNA的质粒。一个具有腺病毒的启动子(PmL1),另一个无启动子(PC1)。把两种质粒同纯化的RNApolⅡ、纯化好的转录因子样品及32P-CTP混合,除此之外,再加入各种组合的GTP、RNaseT1(可以切开RNA与G的连接)和3'-氧甲基GTP(无论何时它参入正在形成的链,它就会终止转录),通过凝胶电泳测定结果如图13-3-42所示。
A.用相同的限制酶切割
B.用识别相同靶序列的不同限制酶切割
C.用识别不同序列但可产生一致的粘性末端的限制酶切割
D.A和B
E.A、B和C